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一 引言
復方蘆丁片屬于維生素類藥,主要用于高血壓病的輔助治療,其主要成分為蘆丁和維生素C(圖1為其分子結構圖)。蘆丁是維生素P的一種,具有維持血管抵抗力、降低其通透性、減少脆性及抗炎、抗病毒等作用;維生素C為人體必需的營養成分,臨床用于壞血病的預防及治療,可增加對感染的抵抗力[1]。
圖1 蘆丁和維生素C的分子結構
Figrue 1 The stucture of Rutin and Vintamin C
蘆丁[2,3]和維C[4,5]的測定方法有很多,其中液相色譜法[6,7]較多被應用,陳剛等[8]以碳圓盤電極為工作電極,用液相色譜法測定了復方蘆丁片中的蘆丁和維C。本文以碳纖維微電極為工作電極,采用液相色譜法同時測定了復方蘆丁和維C。
二 實驗部分
1 儀器和試劑
STI5000液相色譜儀(上海禾工科學儀器有限公司); PH620型便攜式酸度計;電化學測量采用三電極系統,超聲波清洗器(天津東康),溶劑過濾器 (天津東康)。甲醇:乙腈70:30。
蘆?。╞aicalin)對照品(中國藥品生物制品檢定所),維生素C(分析純,北京化工廠),復方蘆丁片(北京市燕京制藥廠,批號981104),其它試劑均為分析純,試驗用水為二次重蒸水。
2 標準溶液的制備
準確稱取蘆丁和維生素C,分別用適量乙醇及水溶解,使濃度為1.0mg/mL,以0.45μm濾膜過濾后備用。
3 樣品溶液的制備
準確稱取復方蘆丁片10片(每片標示值0.1g),獲得一片藥的平均重量,用研缽研成細粉,準確稱取相當于5片藥片質量的粉末于盛有50ml 40mmol/L硼砂-乙醇 (體積比1:1)混合溶液的燒杯中,于50oC水浴中預熱15min后,超聲助溶2min,經普通濾紙過濾,濾液定容于50ml容量瓶中,即得復方蘆丁片樣品溶液,以0.45μm濾膜過濾后備用。
三、結果與討論
4 工作曲線及檢測限
在上述實驗條件下,對一系列蘆丁和維C的標準混合樣品進行分析測定,測定其峰電流與濃度的關系,所得蘆丁和維C的回歸方程、線性范圍、相關系數及檢測限如表1所示。
表1 蘆丁和維C的回歸方程及檢測限
Table 1 The regression equations and the detection limits of Rutin and Vitamin C
回歸方程 相關系數 線性范圍 檢測限
化合物 Y=a+bX* (mg/ml) (mg/ml)
蘆丁 Y=1.99+79.1X 0.9963 8.0×10-5~0.5 5.0×10-5
維C Y=10.9+89.5X 0.9924 5.0×10-5~0.5 2.0×10-5
*Y和X分別表示 峰電流(nA)及被測物濃度(mg/ml) (The Y and X are the peak current and concentration of the analytes)
**檢測限按信噪比為3計算(The detection limits are estimated on the basis of a signal to noise ratio of 3)
2.5 精密度實驗
濃度為0.1mg/ml的蘆丁和維C對照品溶液各平行進樣6次,測得蘆丁峰高的RSD為1.1%,遷移時間的RSD為1.8%;維C峰高的RSD為2.2%,遷移時間的RSD為1.4%。
圖3 實際樣品的色譜圖
Fig.3 The electropherograms of S
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